OECD 207: Akuter Toxizitätstest mit Regenwürmern

Der 48-stündige akute Daphnien-Immobilisationstest nach OECD 202 bewertet die kurzfristige aquatische Toxizität, indem die Immobilisation von Daphnien, üblicherweise Daphnia magna, gemessen und aus diesen Beobachtungen Konzentrations-Wirkungs-Werte abgeleitet werden. Die primär berichtete Kenngröße ist die EC50 nach 48 Stunden, mit einer optionalen EC50 nach 24 Stunden, die aus einer Dosis-Wirkungs-Berechnung ermittelt wird. Das Protokoll gestaltet sich wie folgt: Der Test beginnt mit weniger als 24 Stunden alten Neonaten, die 48 Stunden lang mindestens fünf Konzentrationen plus einer Kontrolle ausgesetzt werden, mit mindestens zwanzig Tieren pro Konzentration, die typischerweise in Replikatgruppen angeordnet sind (zum Beispiel vier Replikate zu je fünf Tieren)., Die Immobilisation wird nach 24 und 48 Stunden beobachtet und dokumentiert, und die Zahlen oder Anteile immobilisierter Tiere in jeder Konzentration und in der Kontrolle werden für die statistische Modellierung tabelliert., Prüflösungen werden durch Verdünnen der Substanz in geeignetem Prüfmedium hergestellt – möglichst ohne Einsatz von Lösungsmitteln oder Emulgatoren. Analytische Messungen der Prüfsubstanzkonzentration, des gelösten Sauerstoffs und des pH-Werts werden zu Beginn und am Ende der Exposition durchgeführt, um die Bedingungen zu dokumentieren., Der biologische Endpunkt ist die direkte Beobachtung des Verlusts der Schwimmaktivität im Sinne einer Immobilisierung. EC50-Werte werden durch Dosis-Wirkungs-Modellierung ermittelt und üblicherweise in Konzentrationseinheiten wie mg/l angegeben.. Der Bericht enthält die Anzahl oder den Anteil der pro Konzentration und Kontrolle zu jedem Zeitpunkt immobilisierten Tiere, die berechneten EC50-Werte sowie unterstützende Daten zur Wasserchemie und zu analytisch bestimmten Konzentrationen. Die Methode ist im Rahmen von REACH für die Charakterisierung der aquatischen Gefährdung in Registrierungsdossiers anerkannt, die bei der ECHA eingereicht werden, wobei OECD TG 202 der EU-Methode C.2 nach der Verordnung (EG) Nr. 440/2008 der Kommission entspricht. Nach dem US-amerikanischen Toxic Substances Control Act (TSCA) kann die EPA für neue chemische Stoffe, bei denen eine akute Toxizität zu erwarten ist, akute Daphnien-Toxizitätstests nach OPPTS 850.1010/OECD 202 verlangen.

Der bakterielle Rückmutationstest (AMES-Test) wird verwendet, um die genotoxische Wirkung eines Medizinprodukts oder dessen Extrakt bei Kontakt mit einer Bakteriensuspension zu bewerten. Der Test wird gemäß OECD 471 und ISO 10993-3 durchgeführt, indem eine Bakteriensuspension von Salmonella spp. und Escherichia coli fünf verschiedenen Konzentrationen des Medizinprodukts oder seiner reinen Extrakte ausgesetzt wird. Der AMES-Test ist ein vorläufiger "Screening-Test" zur Beurteilung der Genotoxizität. Eine vollständige Genotoxizitätsprüfung umfasst in der Regel die Untersuchung des Produkts mit zwei In-vitro-Methoden, von denen der AMES-Test typischerweise zuerst durchgeführt wird. Bei Bedarf kann zusätzlich eine In-vivo-Methode angewendet werden. Measurlabs kann Sie bei der vollständigen Bewertung der Genotoxizität unterstützen. Bitte kontaktieren Sie unsere Fachleute für ein Angebot.

In-vitro-Bewertung des Hautsensibilisierungspotenzials unter Verwendung des Human Cell Line Activation Test (h-CLAT) gemäß der OECD-Testleitlinie 442E. Die Prüfung kann unter GLP-Bedingungen durchgeführt werden. Wir bieten diesen Test in erster Linie für flüssige Medizinprodukte an, es können jedoch auch andere Chemikalien analysiert werden. Die Ergebnisse können für die UN-GHS-Klassifizierung als Hautsensibilisierer verwendet werden und unterstützen die Bewertung des Hautsensibilisierungsrisikos im Rahmen der biologischen Beurteilung nach ISO 10993. Die Prüfung wird in zwei Schritten durchgeführt: Zunächst werden in einem Dosisfindungstest mit Zytotoxizitätsbewertung geeignete nicht- oder subzytotoxische Konzentrationen ermittelt. Im Haupttest wird anschließend die Expression der Oberflächenmarker CD86 und CD54 mittels Durchflusszytometrie unter Verwendung fluorochrommarkierter Antikörper gemessen. Die Ergebnisse werden als relative Fluoreszenzintensität (RFI) im Vergleich zur Lösungsmittelkontrolle angegeben und anhand des h-CLAT-Vorhersagemodells interpretiert, um eine Positive (GHS-Kategorie-1-Sensibilisierer) oder Negative Einstufung zu erhalten.

Bewertung der Wirkung einer Prüfsubstanz auf die Keimung und das frühe Wachstum von Sämlingen höherer Pflanzen gemäß OECD-Prüfrichtlinie 208. Die Substanz wird auf die Bodenoberfläche aufgebracht oder in den Boden eingemischt, wobei bei Bedarf Wasser, Aceton oder Ethanol als Träger eingesetzt werden; Pflanzenschutzmittel können zur Nachbildung der Feldanwendung als Spritzapplikation ausgebracht werden, und schlecht lösliche Materialien können als eingewogene Zusätze dem Trockensubstrat beigemischt werden. Samen von mindestens sechs Pflanzenarten aus unterschiedlichen Familien werden in behandeltem natürlichen Boden oder künstlichem Substrat ausgesät und 14 bis 21 Tage nach Erreichen von 50 % Auflauf in den Kontrollen beobachtet. Folgende Endpunkte werden bestimmt: Prozentuale Keimung / Auflauf der Sämlinge, Spross-Trocken- oder Frischmasse, Sprosslänge (sofern von der Zulassungsbehörde gefordert), Visueller Phytotoxizitäts-Score auf einer einheitlichen Schädigungsskala (Chlorose, Nekrose, Welken, Deformation, Mortalität). Die analytische Verifizierung der Prüfsubstanzkonzentrationen wird durchgeführt, sofern dies bei löslichen Formulierungen möglich ist; bei unlöslichen Substanzen erfolgt die Bestätigung über eingewogene Zusätze und, falls erforderlich, über Untersuchungen zur Bodenhomogenität. Single-Rate-Studien berichten das beobachtete Wirkungsniveau oder dessen Ausbleiben. Multi-Rate-Studien werden modelliert, um ECx/ERx-Werte (z. B. EC25/ER25, EC50/ER50) mit Konfidenzintervallen und gegebenenfalls NOEC und LOEC abzuleiten. Auflaufdaten werden als quantale Antworten unter Verwendung von Logit-, Probit-, Weibull- oder Spearman–Kärber-Modellen ausgewertet. OECD TG 208 wird für die Bewertung der Auswirkungen auf Nichtzielpflanzen in den EU-Rechtsrahmen akzeptiert, einschließlich REACH (wo ECHA Leitlinien zu seiner Verwendung für die Charakterisierung der Gefahren für Landpflanzen herausgegeben hat) und der Verordnung (EG) Nr. 1107/2009 über Pflanzenschutzmittel (mit Testmethoden, die in Mitteilung der Kommission (2023/C 344/02) aufgeführt sind). In den USA umfassen die angeglichenen EPA-Richtlinien OCSPP 850.4100 (Sämlingsaufgang und Sämlingswachstum) und OCSPP 850.4230 (Toxizitätstest im frühen Sämlingswachstum).

Bewertung des Hautkorrosionspotenzials mit einem rekonstruierten humanen Epidermis (RhE)-Modell gemäß OECD-Prüfrichtlinie 431. Das Verfahren bestimmt, ob eine Prüfsubstanz ätzend oder nicht ätzend ist und ordnet, sofern durch die Daten gestützt, UN-GHS-Subkategorien (1A, 1B oder 1C) zu. RhE-Gewebe werden topisch mit der Prüfsubstanz unter kurzer und längerer Expositionsdauer behandelt. Die Gewebeviabilität wird mit dem MTT-Assay bestimmt, bei dem MTT zu Formazan umgewandelt und spektrophotometrisch als prozentuale Viabilität relativ zu einer Negativkontrolle quantifiziert wird. Für gefärbte Substanzen oder Substanzen, die MTT direkt reduzieren, wird HPLC/UPLC-Spektrophotometrie eingesetzt, um die MTT-Formazan-Peakfläche zu quantifizieren und Interferenzen zu eliminieren. Geeignete Kontrollen für unspezifische MTT-Reduktion und Farbstörungen werden, sofern erforderlich, einbezogen. Die Ergebnisse werden als prozentuale Viabilität für jede Replik und als Mittelwerte über die Replikate mit Variationskoeffizienten angegeben und anhand der in OECD TG 431 definierten Grenzwerte des Vorhersagemodells interpretiert. Der Prüfbericht enthält die Gefährdungsbeurteilung – ätzend oder nicht ätzend, mit Angabe der Subkategorie, sofern zutreffend – zusammen mit den zugrunde liegenden numerischen Daten. Daten, die nach OECD 431 generiert werden, werden für die UN-GHS-Gefahrklassifizierung und -Kennzeichnung, für REACH-Dossiers gemäß Verordnung (EG) Nr. 440/2008 sowie für die EU-CLP-Klassifizierung anerkannt.

Bewertung der hemmenden Wirkung von Chemikalien auf Mikroorganismen im Belebtschlamm durch Messung der Sauerstoffaufnahme gemäß OECD-Prüfrichtlinie 209 (gleichwertig mit der EU-Methode C.11 nach Verordnung (EG) Nr. 440/2008 der Kommission). Der Test ist auf wasserlösliche, schwerlösliche und flüchtige Substanzen anwendbar, wobei für flüchtige Verbindungen geeignete Maßnahmen zur Aufrechterhaltung der Expositionskonzentrationen getroffen werden. Belebtschlamm aus einer Abwasserbehandlungsanlage, die überwiegend häusliches Abwasser behandelt, wird einer geometrischen Reihe von Prüfsubstanzkonzentrationen zusammen mit synthetischem Abwasserzulauf und Verdünnungswasser über 3 Stunden bei 20 ± 2 °C und pH 7,5 ± 0,2 ausgesetzt. Die Sauerstoffaufnahme wird mit einer Elektrode für gelösten Sauerstoff in einer geschlossenen Messzelle gemessen. Falls erforderlich, kann die Gesamtatmung wie folgt aufgetrennt werden: Heterotrophe Atmung (Kohlenstoffoxidation), Nitrifikation (Ammoniumoxidation), bestimmt durch Messung der Sauerstoffaufnahme mit und ohne N-Allylthiourea, einem spezifischen Nitrifikationshemmer. Für rasch abbaubare oder flüchtige Verbindungen steht eine optionale kürzere Kontaktzeit (z. B. 30 Minuten) zur Verfügung. Qualitätskontrollen umfassen Blindproben, optionale abiotische Kontrollen (kein Inokulum) sowie eine Referenzsubstanz (typischerweise 3,5-Dichlorphenol) zur Bestätigung der Schlammempfindlichkeit. Die Ergebnisse werden als Sauerstoffaufnahmeraten und prozentuale Hemmung im Vergleich zu den Kontrollen angegeben. Primäre Endpunkte sind ECx-Werte (z. B. EC50) und/oder NOEC, ausgedrückt in mg/l. Die Ergebnisse identifizieren außerdem nicht hemmende Konzentrationen, die für nachfolgende Prüfungen der biologischen Abbaubarkeit geeignet sind. Die Methode wird in bei der ECHA eingereichten REACH-Registrierungsdossiers akzeptiert, wo sie die Informationsanforderung zur Toxizität gegenüber Mikroorganismen erfüllt. Die eng verwandte US-amerikanische EPA OPPTS 850.6800 (Modifizierter Belebtschlamm, Atmungshemmungstest für schwerlösliche Chemikalien) beschreibt eine modifizierte Version desselben Tests für schwerlösliche Substanzen.

Bestimmung der Wirkung einer Prüfsubstanz auf das Wachstum von Süßwasser-Mikroalgen und Cyanobakterien gemäß OECD-Prüfrichtlinie 201 (entspricht der EU-Methode C.3 nach Verordnung (EG) Nr. 440/2008 der Kommission zu REACH-Prüfmethoden). In dem Test werden sich exponentiell vermehrende Algen- oder Cyanobakterienkulturen in Ansatzgefäßen mindestens fünf Prüfkonzentrationen ausgesetzt, in der Regel mit drei Replikaten pro Konzentration, um eine Konzentrations-Wirkungs-Beziehung zu erzeugen. Die Tests werden in nährstoffreichem Medium unter kontinuierlicher fluoreszenter Beleuchtung durchgeführt, wobei der pH-Wert zu Beginn und am Ende der Exposition aufgezeichnet wird. Mikroskopische Kontrollen werden durchgeführt, um anfangs ein normales, gesundes Inokulum zu verifizieren und am Testende etwaige morphologische Auffälligkeiten zu dokumentieren. Das Wachstum wird im Zeitverlauf mithilfe eines Biomasse-Surrogats, wie Zellzahl und/oder Fluoreszenz, quantifiziert, aus dem durchschnittliche spezifische Wachstumsrate und Ertrag als primäre Antwortvariablen abgeleitet werden. Es wird empfohlen, zu Beginn und am Ende der Exposition eine chemische Analyse des Prüfmediums durchzuführen, mit zusätzlichen Zwischenprobenahmen, wenn Konzentrationsverluste zu erwarten sind; für Messungen gelöster Konzentrationen können Algen vor der Analyse vom Medium getrennt werden (z. B. durch Zentrifugation mit niedriger g-Kraft). Die Ergebnisse werden als Konzentrations-Wirkungs-Kurven mit ErC50- sowie NOEC/LOEC-Werten dargestellt, die aus der durchschnittlichen spezifischen Wachstumsrate und dem Ertrag berechnet werden, basierend auf Anfangs-/Nominalkonzentrationen oder expositionsbasierten Kenngrößen wie geometrischen Mittelwerten oder modelliertem Konzentrationsabfall, sofern anwendbar. pH-Werte und mikroskopische Beobachtungen werden im Abschlussbericht dokumentiert. Die OECD-201-Methode wird in behördlichen Einreichungen im Rahmen der EU-REACH-Verordnung als Bestandteil der Charakterisierung der aquatischen Gefährdung anerkannt sowie im Rahmen des US-amerikanischen Gefahrstoff-Überwachungsgesetz Toxic Substances Control Act (TSCA), in dessen Rahmen die EPA für neue Stoffe Algen-Toxizitätstests nach OPPTS 850.5400/OECD 201 verlangen kann.

Zweck von Validierungsstudien zur Aufbereitung ist es nachzuweisen, dass wiederverwendbare Medizinprodukte zwischen den Anwendungen effektiv aufbereitet werden können, sodass Patientinnen und Patienten keinen Krankheitserregern ausgesetzt werden. Abhängig vom vorgesehenen Verwendungszweck und der Klassifizierung des Produkts können geeignete Aufbereitungsschritte Reinigung, Desinfektion und/oder Sterilisation umfassen. Für die Reinigungsvalidierung im engeren Sinne besteht das Prüfverfahren aus drei Schritten: Simulierte Kontamination mit künstlichen Verschmutzungen, die klinisch relevante Verunreinigungen wie Blut und andere Körperflüssigkeiten realitätsgetreu abbilden., Reinigung (manuell und/oder automatisiert) unter sorgfältiger Beachtung der Herstellerangaben zu Parametern wie Reinigungsmitteln, Reinigungswerkzeugen, Wasserqualität und Temperatur., Inspektion, sowohl visuell als auch unter Verwendung quantitativer, für den Prüfboden relevanter Methoden (z. B. Proteine, Gesamtorganischer Kohlenstoff oder Hämoglobin), um zu beurteilen, ob sich noch Restkontaminationen auf dem Gerät befinden.. Eine erfolgreiche Reinigungsvalidierung ist häufig ausreichend für nichtkritische, wiederverwendbare Geräte wie Blutdruckmanschetten, Monitore und Klemmen. Für semikritische und kritische Geräte sind weitergehende Validierungsstudien zur Desinfektion und/oder Sterilisation erforderlich, die wir ebenfalls anbieten können. Der angegebene Beispielpreis umfasst eine manuelle Reinigungsvalidierungsstudie mit 6 Aufbereitungszyklen sowie Reinigbarkeitsbewertungen mittels visueller Inspektion & Bestimmung des Proteingehalts. Die Ausarbeitung des Prüfprotokolls und die Berichterstellung sind ebenfalls enthalten.

Analyse der spezifischen Oberfläche poröser, fester Materialien gemäß der BET-Theorie (Brunauer–Emmett–Teller). Die Analyse kann je nach erwarteter Oberfläche des Materials mit N2- oder Kr-Gasen durchgeführt werden. Die BET-Kurve und die spezifische Oberfläche (in m2/g) werden angegeben. Die erforderliche Probenmenge hängt von der erwarteten Oberfläche ab. Als Faustregel sollten für die Messung mindestens 5 m2 Oberfläche zur Verfügung stehen. Für diese Messung werden die folgenden Gasadsorptionsgeräte verwendet: Micromeritics Gemini VII 2390, Micromeritics ASAP 2020, Micromeritics TriStar II 3020, Anton Paar Nova 800.

Die Analyse von besonders besorgniserregenden Stoffen (SVHC) ermöglicht ein umfassendes Materialscreeing auf SVHC‑Substanzen, die in der Verordnung zur Registrierung, Bewertung und Zulassung von Chemikalien (REACH) aufgeführt sind. Die für die Analyse verwendete Stoffliste wird regelmäßig aktualisiert, sobald neue Überarbeitungen von der ECHA (zweimal pro Jahr) veröffentlicht werden. Die maximal zulässige Konzentration eines beliebigen Stoffes auf der SVHC-Liste beträgt 0,1 Massen-%. Wenn das Produkt mehr als 0,1 % (Gew.-%) eines SVHC-Stoffes enthält, muss die ECHA informiert werden und den Kunden sind auf Anfrage Informationen zur sicheren Verwendung des Erzeugnisses bereitzustellen. Kontaktieren Sie uns, um ein Angebot für das Screening Ihres Materials auf SVHCs anzufordern. Der Preis der Analyse hängt von der Art der Probe ab.