Bakterieller Rückmutationstest (Ames-Test) zur Bewertung der Genotoxizität

ISO 10993-3 ist eine international anerkannte Norm zur Bewertung des Potenzials von Medizinprodukten und deren Komponenten, während der klinischen Anwendung irreversible genetische Schäden zu verursachen. Eine gemäß dieser Norm durchgeführte Genotoxizitätsbewertung ist in der Regel für Produkte erforderlich, die auf folgende Arten mit dem menschlichen Körper in Kontakt kommen: Längerer (>24 h bis 30 Tage) oder langfristiger (>30 Tage) Kontakt mit Geweben, Knochen oder Dentin, Langfristiger Kontakt mit Schleimhäuten oder verletzten Oberflächen, Langfristiger indirekter Kontakt mit Blut, Kontakt jeglicher Dauer mit zirkulierendem Blut. Die Bewertung umfasst eine Überprüfung der vorhandenen Sicherheitsdaten, wie zum Beispiel Ergebnisse aus der chemischen Charakterisierung und toxikologischen Studien. Prüfungen sind erforderlich, wenn die vorhandenen Daten nicht alle potenziellen Risiken ausreichend abdecken.  Genotoxizitätstests bewerten das Potenzial des Produkts, Genmutationen oder chromosomale Schäden zu verursachen. Da mit einem einzelnen Test nicht alle Genotoxine nachgewiesen werden können, sollte die Bewertung mindestens zwei In-vitro-Tests umfassen: Ein bakterieller Rückmutationstest (Ames-Test) wird in der Regel zunächst als schneller Screening-Test durchgeführt., Ein weiterer In-vitro-Assay, wie der Maus Lymphoma-Assay (MLA) oder der Mikronukleustest (MNT) an Säugerzellen, wird anschließend durchgeführt, um genotoxische Substanzen zu erfassen, die im Ames-Test nicht nachgewiesen wurden.. Weitere In-vitro- oder In-vivo-Tests, wie etwa In-vivo-Chromosomenaberrations-Assays (OECD 475) oder In-vivo-transgene Nagermutagenitäts-Assays (OECD 488), können erforderlich sein, wenn in den beiden initialen In-vitro-Tests genotoxische Effekte beobachtet werden. Die Testauswahl hängt von mehreren Faktoren ab, darunter Gerätekategorie, Kontaktart, Expositionsdauer, Zielmarkt sowie einer möglichen Zytotoxizität von Geräteextrakten. Measurlabs bietet sowohl die oben aufgeführten Genotoxizitätstests als auch fachkundige Unterstützung bei der Ausarbeitung eines Prüfplans an. Über das untenstehende Formular können Sie uns kontaktieren, um ein Angebot zu erhalten. Bitte beachten Sie, dass die Methoden auch an andere Probentypen angepasst werden können, einschließlich Pharmazeutika, Chemikalien und neuartiger Lebensmittelzutaten.

In-vitro-Bewertung des Hautsensibilisierungspotenzials unter Verwendung des Human Cell Line Activation Test (h-CLAT) gemäß der OECD-Testleitlinie 442E. Die Prüfung kann unter GLP-Bedingungen durchgeführt werden. Wir bieten diesen Test in erster Linie für flüssige Medizinprodukte an, es können jedoch auch andere Chemikalien analysiert werden. Die Ergebnisse können für die UN-GHS-Klassifizierung als Hautsensibilisierer verwendet werden und unterstützen die Bewertung des Hautsensibilisierungsrisikos im Rahmen der biologischen Beurteilung nach ISO 10993. Die Prüfung wird in zwei Schritten durchgeführt: Zunächst werden in einem Dosisfindungstest mit Zytotoxizitätsbewertung geeignete nicht- oder subzytotoxische Konzentrationen ermittelt. Im Haupttest wird anschließend die Expression der Oberflächenmarker CD86 und CD54 mittels Durchflusszytometrie unter Verwendung fluorochrommarkierter Antikörper gemessen. Die Ergebnisse werden als relative Fluoreszenzintensität (RFI) im Vergleich zur Lösungsmittelkontrolle angegeben und anhand des h-CLAT-Vorhersagemodells interpretiert, um eine Positive (GHS-Kategorie-1-Sensibilisierer) oder Negative Einstufung zu erhalten.

Bewertung des Hautkorrosionspotenzials mit einem rekonstruierten humanen Epidermis (RhE)-Modell gemäß OECD-Prüfrichtlinie 431. Das Verfahren bestimmt, ob eine Prüfsubstanz ätzend oder nicht ätzend ist und ordnet, sofern durch die Daten gestützt, UN-GHS-Subkategorien (1A, 1B oder 1C) zu. RhE-Gewebe werden topisch mit der Prüfsubstanz unter kurzer und längerer Expositionsdauer behandelt. Die Gewebeviabilität wird mit dem MTT-Assay bestimmt, bei dem MTT zu Formazan umgewandelt und spektrophotometrisch als prozentuale Viabilität relativ zu einer Negativkontrolle quantifiziert wird. Für gefärbte Substanzen oder Substanzen, die MTT direkt reduzieren, wird HPLC/UPLC-Spektrophotometrie eingesetzt, um die MTT-Formazan-Peakfläche zu quantifizieren und Interferenzen zu eliminieren. Geeignete Kontrollen für unspezifische MTT-Reduktion und Farbstörungen werden, sofern erforderlich, einbezogen. Die Ergebnisse werden als prozentuale Viabilität für jede Replik und als Mittelwerte über die Replikate mit Variationskoeffizienten angegeben und anhand der in OECD TG 431 definierten Grenzwerte des Vorhersagemodells interpretiert. Der Prüfbericht enthält die Gefährdungsbeurteilung – ätzend oder nicht ätzend, mit Angabe der Subkategorie, sofern zutreffend – zusammen mit den zugrunde liegenden numerischen Daten. Daten, die nach OECD 431 generiert werden, werden für die UN-GHS-Gefahrklassifizierung und -Kennzeichnung, für REACH-Dossiers gemäß Verordnung (EG) Nr. 440/2008 sowie für die EU-CLP-Klassifizierung anerkannt.

Zweck von Validierungsstudien zur Aufbereitung ist es nachzuweisen, dass wiederverwendbare Medizinprodukte zwischen den Anwendungen effektiv aufbereitet werden können, sodass Patientinnen und Patienten keinen Krankheitserregern ausgesetzt werden. Abhängig vom vorgesehenen Verwendungszweck und der Klassifizierung des Produkts können geeignete Aufbereitungsschritte Reinigung, Desinfektion und/oder Sterilisation umfassen. Für die Reinigungsvalidierung im engeren Sinne besteht das Prüfverfahren aus drei Schritten: Simulierte Kontamination mit künstlichen Verschmutzungen, die klinisch relevante Verunreinigungen wie Blut und andere Körperflüssigkeiten realitätsgetreu abbilden., Reinigung (manuell und/oder automatisiert) unter sorgfältiger Beachtung der Herstellerangaben zu Parametern wie Reinigungsmitteln, Reinigungswerkzeugen, Wasserqualität und Temperatur., Inspektion, sowohl visuell als auch unter Verwendung quantitativer, für den Prüfboden relevanter Methoden (z. B. Proteine, Gesamtorganischer Kohlenstoff oder Hämoglobin), um zu beurteilen, ob sich noch Restkontaminationen auf dem Gerät befinden.. Eine erfolgreiche Reinigungsvalidierung ist häufig ausreichend für nichtkritische, wiederverwendbare Geräte wie Blutdruckmanschetten, Monitore und Klemmen. Für semikritische und kritische Geräte sind weitergehende Validierungsstudien zur Desinfektion und/oder Sterilisation erforderlich, die wir ebenfalls anbieten können. Der angegebene Beispielpreis umfasst eine manuelle Reinigungsvalidierungsstudie mit 6 Aufbereitungszyklen sowie Reinigbarkeitsbewertungen mittels visueller Inspektion & Bestimmung des Proteingehalts. Die Ausarbeitung des Prüfprotokolls und die Berichterstellung sind ebenfalls enthalten.

ISO 10993-23 ist eine international anerkannte Norm zur Bewertung des Reizpotenzials von Medizinprodukten, wenn diese mit der Haut, Schleimhäuten oder subkutanem Gewebe in Kontakt kommen. Nach dieser Norm durchgeführte Irritationstests werden üblicherweise eingesetzt, um die Konformität mit den Anforderungen der EU-MDR und der FDA nachzuweisen. Der geeignete Prüfansatz wird anhand der Körperkontaktstelle ausgewählt: Hautreizungstests bewerten, ob ein Medizinprodukt oder Material bei direktem Kontakt mit der Haut eine lokale Hautreizung verursacht. Die Prüfung kann je nach Produkt und Zielmarkt in vivo oder mithilfe in vitro‑Methoden durchgeführt werden., Intrakutane Reaktivitätstests beziehen sich auf Medizinprodukte oder Materialien, die die Haut durchdringen oder mit tieferem Gewebe in Kontakt kommen. Ziel ist es festzustellen, ob Extrakte aus solchen Produkten lokal begrenzte Entzündungsreaktionen in der Dermis oder im subkutanen Gewebe hervorrufen.. Wenn möglich, wird das Gerät selbst mit einer Direktkontaktmethode geprüft. Alternativ werden polare und unpolare Lösungsmittel verwendet, um Extrakte herzustellen, die potenzielle aus dem Gerät freisetzbare Stoffe simulieren. Der angegebene Beispielpreis umfasst einen In-vivo-Direkthauttonreizungstest, der unter GLP-Bedingungen durchgeführt wird. Für ein genaueres Angebot zögern Sie bitte nicht, uns eine Beschreibung Ihres Geräts sowie etwaige zusätzliche Anforderungen an die Prüfung mitzuteilen (z. B. Marktregion, Qualitätsmanagementsysteme, In-vivo- vs. In-vitro-Methoden).

Bewertung des Hautsensibilisierungspotenzials mit der ARE‑Nrf2‑Luciferase‑Testmethode gemäß OECD Test Guideline 442D, die in Anhang C der ISO 10993‑10 als in‑vitro‑Alternative zu herkömmlichen in vivo‑Sensibilisierungstests aufgeführt ist. Die Methode wurde für Extrakte aus Medizinprodukten validiert. Der Assay modelliert den Keratinozyten‑Aktivierungsweg – Schlüsselereignis 2 im Adverse‑Outcome‑Pathway (AOP) der Hautsensibilisierung, wie von der OECD beschrieben. Humane Keratinozyten werden einer Reihe von Konzentrationen der Prüfsubstanz ausgesetzt. Weist die Substanz ein Hautsensibilisierungspotenzial auf, aktiviert sie den Transkriptionsfaktor Nrf2, der an das Antioxidant‑Response‑Element (ARE) bindet und die Expression von Luciferase induziert. Die gemessene Luciferase‑Aktivität korreliert somit mit dem Sensibilisierungspotenzial der Substanz. Gemäß Anhang C der ISO 10993‑10 wird eine Substanz als Hautsensibilisator eingestuft, wenn die Luciferase‑Aktivität bei einer Konzentration, bei der die Zellviabilität nicht signifikant vermindert ist, um 50 % gegenüber der Lösungsmittelkontrolle zunimmt. Pro geprüftem Medizinprodukt werden zwei Extrakte (ein polarer und ein unpolarer) hergestellt, und die Prüfung wird für jedes Lösungsmittel in Duplikaten durchgeführt.

Wir bieten umfassende Testpakete zur Überprüfung der Qualität von Typ-II- und Typ-IIR-Gesichtsmasken gemäß der Norm EN 14683 an. Die in den Paketen enthaltenen Prüfungen sind für Gesichtsmasken mit der CE-Kennzeichnung erforderlich. Medizinische Gesichtsmasken werden entsprechend ihrer bakteriellen Filtrationseffizienz in die Typen I und II unterteilt. Typ-I-Masken sind nicht für Beschäftigte im Gesundheitswesen bestimmt, sondern für die Allgemeinbevölkerung, um die Ausbreitung von Infektionskrankheiten zu verhindern. Typ-II-Masken werden weiter danach klassifiziert, ob sie spritzbeständig (Typ IIR) sind oder nicht (Typ II). Um der europäischen Norm EN 14683 zu entsprechen, müssen chirurgische Gesichtsmasken des Typs II die folgenden Qualitätsprüfungen durchlaufen: Bakterielle Filtrationseffizienz (BFE) – Die Fähigkeit der Atemschutzmaske, das Bakterium Staphylococcus aureus zu filtern. Die BFE wird als Prozentsatz der koloniebildenden Einheiten (KBE) angegeben, die in Aerosolform durch die Atemschutzmaske hindurchgetreten sind. Besteht eine Atemschutzmaske aus zwei oder mehr Bereichen mit unterschiedlichen Eigenschaften, werden diese Bereiche getrennt geprüft., Atmungsaktivität (Differenzdruck) – Der erforderliche Differenzdruck, um Luft bei einer konstanten Durchflussrate durch eine definierte Oberfläche zu ziehen., Mikrobiologische Reinheit (Bioburden) – Die Bestimmung der koloniebildenden Einheiten pro Gramm gemäß EN ISO 11737-1., Biokompatibilität – Der Hersteller medizinischer Gesichtsmasken muss eine Biokompatibilitätsbewertung gemäß ISO 10993-1 als Oberflächenprodukt mit begrenztem Kontakt durchführen. Das anzuwendende toxikologische Prüfprogramm ist ebenfalls festzulegen.. Zusätzlich zu den oben genannten Anforderungen müssen Typ-IIR-Masken den folgenden Test durchlaufen: Spritzbeständigkeit – Dieser Test wird gemäß ISO 22609 durchgeführt und bestimmt die Fähigkeit einer Gesichtsmaske, dem Eindringen von Flüssigkeitsspritzern bei verschiedenen Drücken zu widerstehen.. Der niedrigere angezeigte Preis gilt für das Testpaket für Masken des Typs II, während der höhere Preis zusätzlich die für Masken des Typs IIR erforderliche Spritzwiderstandsprüfung umfasst.

Die Biokompatibilität von Medizinprodukten mit Atemgaswegen wird in der Regel gemäß den ISO 18562-Normen bewertet. Measurlabs bietet Prüfungen gemäß dieser Normenreihe an, darunter die folgenden: ISO 18562-2: Prüfungen für Emissionen von Partikeln (PM), ISO 18562-3: Prüfungen für Emissionen von flüchtigen organischen Verbindungen (VOCs), ISO 18562-4: Prüfungen für herauslösbare Substanzen in Kondensaten. Unsere Fachleute unterstützen Sie gerne bei allen Fragen zu den Tests und erstellen ein Angebot für Sie. Beschreiben Sie Ihre Testanforderungen über das folgende Formular, und wir werden uns in Kürze bei Ihnen melden.

Der 48-stündige akute Daphnien-Immobilisationstest nach OECD 202 bewertet die kurzfristige aquatische Toxizität, indem die Immobilisation von Daphnien, üblicherweise Daphnia magna, gemessen und aus diesen Beobachtungen Konzentrations-Wirkungs-Werte abgeleitet werden. Die primär berichtete Kenngröße ist die EC50 nach 48 Stunden, mit einer optionalen EC50 nach 24 Stunden, die aus einer Dosis-Wirkungs-Berechnung ermittelt wird. Das Protokoll gestaltet sich wie folgt: Der Test beginnt mit weniger als 24 Stunden alten Neonaten, die 48 Stunden lang mindestens fünf Konzentrationen plus einer Kontrolle ausgesetzt werden, mit mindestens zwanzig Tieren pro Konzentration, die typischerweise in Replikatgruppen angeordnet sind (zum Beispiel vier Replikate zu je fünf Tieren)., Die Immobilisation wird nach 24 und 48 Stunden beobachtet und dokumentiert, und die Zahlen oder Anteile immobilisierter Tiere in jeder Konzentration und in der Kontrolle werden für die statistische Modellierung tabelliert., Prüflösungen werden durch Verdünnen der Substanz in geeignetem Prüfmedium hergestellt – möglichst ohne Einsatz von Lösungsmitteln oder Emulgatoren – und analytische Messungen der Prüfsubstanzkonzentration, des gelösten Sauerstoffs und des pH-Werts werden zu Beginn und am Ende der Exposition durchgeführt, um die Bedingungen zu dokumentieren., Der biologische Endpunkt ist die direkte Beobachtung des Verlusts der Schwimmaktivität im Sinne einer Immobilisierung; EC50-Werte werden durch Dosis-Wirkungs-Modellierung ermittelt und üblicherweise in Konzentrationseinheiten wie mg/L angegeben.. Der Bericht enthält die Anzahl oder den Anteil der pro Konzentration und Kontrolle zu jedem Zeitpunkt immobilisierten Tiere, die berechnete(n) EC50-Wert(e) sowie unterstützende Daten zur Wasserchemie und zu analytisch bestimmten Konzentrationen. Die Methode ist im Rahmen von REACH für die Charakterisierung der aquatischen Gefährdung in Registrierungsdossiers anerkannt, die bei der ECHA eingereicht werden, wobei OECD TG 202 der EU-Methode C.2 nach der Verordnung (EG) Nr. 440/2008 der Kommission entspricht. Nach dem US-amerikanischen Toxic Substances Control Act (TSCA) kann die EPA für neue chemische Stoffe, bei denen eine akute Toxizität zu erwarten ist, akute Daphnien-Toxizitätstests nach OPPTS 850.1010/OECD 202 verlangen.

Pyrogenitätsbewertung gemäß ISO 10993-11 zur Beurteilung des materialvermittelten pyrogenen (d. h. fieberauslösenden) Potenzials von Medizinprodukten. Prüfungen der materialvermittelten Pyrogenität konzentrieren sich auf nicht endotoxinbezogene Substanzen, einschließlich bakterieller Exotoxine, endogener Pyrogene, Prostaglandine, Neurotransmitter und Metallsalze. Diese können mithilfe von in vitro-Assays untersucht werden, bei denen das fieberauslösende Potenzial mit Zellen bewertet wird, oder mit in vivo-Kaninchen-Pyrogentests, bei denen die Körpertemperatur der Tiere nach Exposition gegenüber Geräte-Extrakten überwacht wird. Measurlabs führt Prüfungen mit den folgenden Methoden durch: Materialvermittelte Pyrogenität – In-vivo-Test (Kaninchen), Materialvermittelte Pyrogenität – in vitro (MAT, Monozyten-Aktivierungstest). Bitte fordern Sie ein Angebot für Ihr Medizinprodukt an. Wir bieten außerdem die Prüfung bakterieller Endotoxine (ISO 11737-3) zur Bewertung der endotoxinbedingten Pyrogenität an.