MALDI-tekniikka

Mikä on MALDI ja miten se toimii?

Matriisiavusteinen laserdesorptio/ionisaatio eli MALDI on näytteen valmistustekniikka, jota käytetään valmistelemaan herkkä näyte massaspektrometriaa varten. MALDI:ssa ionisaatio tehdään hellävaraisesti, mikä mahdollistaa molekyylien analysoinnin ilman merkittävää pirstoutumista.

Prosessi alkaa analyytin sekoittamisella matriisiin. Matriisina käytetään yleensä kiteistä materiaalia, joka on liuotettu liuottimeen. Analyytti/matriisiliuos asetetaan metallilevylle, jonka päällä ionisaatio suoritetaan.

Seuraavaksi liuosta säteilytetään laserilla, joka saa protonin siirtymään matriisimolekyylistä analyyttiin ja näytemateriaalin ionisoitumaan. Matriisi auttaa suojaamaan analyyttiä ionisoitumisen aikana ja ehkäisee laserin aiheuttamia vaurioita.

Kun analyytti on ionisoitu, se voidaan siirtää massaspektrometriin analysointia varten. Useimmiten MALDI-valmistelu yhdistetään lentoaika-massaspektrometriaan (ToF-MS), joka saa ionit erottumaan yksittäisten massojen ja varausten perusteella niiden kulkiessa analyysilaitteen läpi. Kun ionit saavuttavat spektrometrin pään, detektori tunnistaa ja laskee ne.

Miksi MALDI:a käytetään?

MALDI on niin kutsuttu "pehmeä" ionisaatiotekniikka, mikä tarkoittaa, että sillä voi ionisoida näytteen molekyylejä ilman että ne hajoavat fragmenteiksi. Usein ionisaatiotekniikat sisältävät elektronien poistamisen analyytistä, mikä voi joissain tapauksissa olla tuhoisaa näytteelle.

MALDI:ssa ionisaatio tapahtuu protoninsiirron kautta, mikä on huomattavasti vähemmän tuhoisaa herkille molekyyleille. Lisäksi desorptioprosessin aikana matriisi auttaa absorboimaan laserista tulevaa energiaa ja suojaa analyyttiä ylialtistumiselta ja hajoamiselta. MALDI on siten molekyylejä vahingoittamaton tekniikka, mikä on tietyillä aloilla erittäin olennaista analyysin onnistumisen kannalta.

Onko MALDI:ssa rajoituksia?

Ylimääräisen matriisin käytöstä johtuen analyytti voi joskus peittyä analyysin aikana. Matala näytemateriaalin määrä voi joskus vaatia ylimääräisiä optimointivaiheita tarkkojen tulosten saavuttamiseksi. Erityisen suuria biomolekyylejä voi myös olla vaikea tunnistaa analyysissä, jos aiempaa massaspektritietoa ei ole olemassa vertailua varten.

Näytevaatimukset ja esivalmistelu

MALDI-valmistelua varten näyte on voitava liottaa sopivaan matriisiliuokseen. Liuotin voi olla vesipohjainen, orgaaninen liuotin tai molempien yhdistelmä, mikä mahdollistaa sekä polaaristen että ei-polaaristen molekyylien liukenemisen. Ihannetapauksessa näytteen tulisi olla mahdollisimman puhdas, sillä sekä orgaaniset että epäorgaaniset epäpuhtaudet voivat vaikuttaa analyysin laatuun ja tarkkuuteen.

Tarvitsetko analyysin MALDI-valmistelulla?

Measurlabs tarjoaa MALDI-tekniikkaa näytteiden valmisteluun tapauskohtaisesti. Jos näytteesi edellyttää MALDI:n käyttöä, ota meihin yhteyttä alla olevan lomakkeen kautta tai sähköpostitse osoitteessa info@measurlabs.com.